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膝骨关节炎患者软骨组织、软骨细胞中let7a 表达变化及意义

更新时间:2018-09-17

【摘要】目的 观察let7a 在膝骨关节炎(KOA)患者软骨组织、软骨细胞中的表达变化,并探讨其对细胞凋亡和自噬的影响.方法 ① 收集40 例KOA 患者及15 例行下肢截肢手术患者的膝关节软骨组织并分离培养软骨细胞.采用实时荧光定量PCR 法分别检测KOA 软骨组织、正常软骨组织及KOA 软骨细胞、正常软骨细胞let7a mRNA相对表达量.② 取生长状态良好的KOA 软骨细胞,随机分为let7a 过表达组和对照组,分别转染let7a mimics及NCmimics,转染48 h 采用实时荧光定量PCR 法检测let7a mRNA 相对表达量,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting 法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl2 及自噬相关蛋白微管相关蛋白1 轻链3(LC3,包括LC3Ⅱ、LC3Ⅰ)、Beclin1 表达,计算Bcl2 / Bax、LC3Ⅱ/ LC3Ⅰ.结果 ① KOA 软骨组织及正常软骨组织let7a mRNA 相对表达量分别为0. 48 ±0. 18、0. 29 ±0. 13,两者相比P 均< 0. 01;KOA 软骨细胞、正常软骨细胞let7a mRNA 相对表达量分别为1. 02 ±0. 07、0. 98 ±0. 05,两者相比P <0. 01.② let7a 过表达组let7a mRNA 相对表达量高于对照组,细胞凋亡率低于对照组(P 均<0. 01);Bcl2、LC3Ⅱ、Beclin1 蛋白相对表达量及Bcl2 / Bax、LC3Ⅱ/ LC3Ⅰ均高于对照组,Bax、LC3Ⅰ蛋白相对表达量均低于对照组(P 均<0. 05).结论 let7a 在KOA 患者软骨组织、软骨细胞中的表达均降低;上调let7a 表达能够促进软骨细胞自噬并抑制其凋亡,从而发挥软骨保护作用

【关键词】

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